對大多數細胞來(lái)而言，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線(xiàn)性PEIMAX轉染試劑進(jìn)行優(yōu)化。PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品，每批產(chǎn)品出廠(chǎng)前都經(jīng)過(guò)嚴格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩定且品質(zhì)高,但由于作為轉染試劑使用過(guò)程中有很多實(shí)驗室因素(配置方法，PH,水純度,稱(chēng)量的準度,dnaRNA純度,細胞狀態(tài)，細胞品系…)造成溶解出現問(wèn)題或者轉染效率出現差異,所以廠(chǎng)家只受理該產(chǎn)品純度，分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴，針對極個(gè)別客戶(hù)溶解問(wèn)題和轉染效率問(wèn)題我們能友善解決。PEI轉染試劑對復合物孵化的時(shí)間是有要求的，一般建議5~20分鐘之間。重慶血清兼容PEI轉染試劑

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉染級無(wú)內質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內質(zhì)粒提取試劑盒）。通過(guò)260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內）。如有可能，請通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養基沒(méi)有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養細胞。更多關(guān)于PEI轉染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！廣東PEI轉染試劑怎么樣用PEI轉染試劑時(shí)，一般和DNA的比例是多少呢？

方法：1．細胞分盤(pán)：通過(guò)胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上（根據實(shí)驗需要選擇培養皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉染。轉染前換入2mL預熱的無(wú)血清培養基。2.制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養皿用420μL反應總體積為例。準備兩支1.5mL離心管，一管將質(zhì)粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中，混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養基中，輕輕搖動(dòng)平皿混勻，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻，保證所取的濃度一致。3.培養6-10h后更換為37℃預熱的含有血清的培養基，繼續培養，16h左右可以觀(guān)測到報告基因的表達。更多關(guān)于PEI轉染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！

接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個(gè)孔置入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會(huì )稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí)，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無(wú)血清條件下轉染時(shí)，去除生長(cháng)培養基，替換成無(wú)血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長(cháng)培養基。更多關(guān)于Polysciences PEI轉染試劑，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！有誰(shuí)用過(guò)40K的PEI轉染試劑？

材料：質(zhì)粒DNA指數生長(cháng)的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱(chēng)取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過(guò)濾，儲存于4℃備用。1×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES，調pH值到7.4，定容至1L，過(guò)濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃備用。方法：1．細胞分盤(pán)：通過(guò)胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上（根據實(shí)驗需要選擇培養皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉染。轉染前換入2mL預熱的無(wú)血清培養基。如何辨別假的PEI轉染試劑。無(wú)動(dòng)物源成分PEI轉染試劑中國代理權

哪個(gè)品牌的PEI轉染試劑性?xún)r(jià)比高呢？重慶血清兼容PEI轉染試劑

瞬時(shí)轉染方法1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個(gè)孔置入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí)，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無(wú)血清條件下轉染時(shí)，去除生長(cháng)培養基，替換成無(wú)血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長(cháng)培養基。4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商，更多關(guān)于轉染試劑相關(guān)問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！重慶血清兼容PEI轉染試劑

上海曼博生物醫藥科技有限公司位于自由貿易試驗區達爾文路16幢104室，擁有一支專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團隊。PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote是上海曼博生物醫藥科技有限公司的主營(yíng)品牌，是專(zhuān)業(yè)的生物醫藥科技（人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應用除外）領(lǐng)域內的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉讓?zhuān)⑻峁┫嚓P(guān)的技術(shù)咨詢(xún)和技術(shù)服務(wù)；計算機軟件的開(kāi)發(fā)、設計、制作（音像制品、電子出版物除外）、銷(xiāo)售自產(chǎn)產(chǎn)品；實(shí)驗室試劑及耗材（藥品、危險品除外）、化工原料及產(chǎn)品（除危險化學(xué)品、監控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品）、儀器儀表、機械設備、電子設備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理（拍賣(mài)除外）。【依法須經(jīng)批準的項目，經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】公司，擁有自己獨立的技術(shù)體系。公司以用心服務(wù)為重點(diǎn)價(jià)值，希望通過(guò)我們的專(zhuān)業(yè)水平和不懈努力，將生物醫藥科技（人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應用除外）領(lǐng)域內的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉讓?zhuān)⑻峁┫嚓P(guān)的技術(shù)咨詢(xún)和技術(shù)服務(wù)；計算機軟件的開(kāi)發(fā)、設計、制作（音像制品、電子出版物除外）、銷(xiāo)售自產(chǎn)產(chǎn)品；實(shí)驗室試劑及耗材（藥品、危險品除外）、化工原料及產(chǎn)品（除危險化學(xué)品、監控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品）、儀器儀表、機械設備、電子設備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理（拍賣(mài)除外）。【依法須經(jīng)批準的項目，經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】等業(yè)務(wù)進(jìn)行到底。自公司成立以來(lái)，一直秉承“以質(zhì)量求生存，以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營(yíng)理念，始終堅持以客戶(hù)的需求和滿(mǎn)意為重點(diǎn)，為客戶(hù)提供良好的血小板裂解液，WB自動(dòng)孵育系統，微流控器官芯片，藍牙無(wú)線(xiàn)標簽機，從而使公司不斷發(fā)展壯大。

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